贾第鞭毛虫和隐孢子虫是两种严重危害水质安全的、寄生于人和动物体内的原生虫,主要通过饮用水和食品等途径传播疾病。
贾第鞭毛虫的致病性小,它引起的疾病被人们广泛接受。
但隐孢子虫卵囊体积更小,两虫质控试剂销售,抗性更强,其造成的危害可能更大于贾第鞭毛虫。
有症状的分为急性的、亚急性和或慢性的,通常报道的症状包括腹泻、胃气涨、腹涨、疲劳、食欲不振、恶心、体重减轻、呕吐。
在此期间甚至去除后乳糖不耐症都会持续。
隐孢子虫和贾第鞭毛虫的纯化
隐孢子虫和贾第鞭毛虫的纯化—磁分离技术:1999年美国在EPA1623方法中规定利用IMS{Immuo Magnetic Separation}磁分离技术Dynabeads来分选检测饮用水中隐孢子虫卵囊和贾第鞭毛虫孢囊,其原理是:利用带有特异性的磁珠与样品中的目标产物G/C特异性抗原相结合,在磁场中搞笑选择中分离。
3、IFA染色&镜检
待井形载玻片的纯化液干后,用NaOH中和井形载玻片上样品,再用Dynal公司的A/C染色试剂盒,将卵囊和孢囊在井形载玻片上用磁荧光标记的单性和DAPI溶液着色后,盖上盖玻片。
然后,OLYMPUS荧光和差分干涉相衬(DIC)显微镜对着色样本进行检测。
观察样本,两虫质控试剂专卖,对符合卵囊和孢囊大小、外形、荧光特性的对象进行定性、定量分析。
水中检测“两虫”的意义
对贾第鞭毛虫和隐孢子虫项目检测方法采用国家《生活饮用水标准检验方法》(GB/T 5750.12-2006)中规定的“磁分离荧光法”,系列“两虫”检测设备都是进口。
由于国内对“两虫”检测研究起步较晚,“两虫”标样、磁分离、荧光试剂等都需进口,大大小小配套仪器有十几台,都需手工操作,操作过程极其繁锁、且要十分细心。
检测“两虫”主要有以下步骤:过滤采样——淘洗浓缩——IMS磁分离——IFA染色——显微镜检,才能到“两虫”的孢囊和卵囊。
因水样中的卵囊数量较少,因此需要浓缩较大体积的水样,成都两虫质控试剂,原水需要20L,处理后的出厂水(管网水)需要100L。
在这么多的水量中 “两虫”的孢囊和卵囊,操作难度大大增加。
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