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真菌毒素亲和柱 中检维康技术有限公司 真菌毒素亲和柱厂家
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发布时间: 2022-12-06 17:05
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亲和柱净化步骤

注意:整个纯化过程尽量不要让柱子干燥!

----3mL柱管取出上方堵头,减去上堵头螺纹下突出部分,插回柱子上,另一端与20mL针筒固定后使用;将1mL柱管上方堵头取出后斜剪断,然后再插回柱子上(柱管内偶见有小气泡属正常现象,不影响亲和柱的使用);

----准确移取上述混匀滤液,注入针筒中,调节针筒压力使其以2秒/滴的速度缓慢通过亲和柱;

----用20mL 水冲洗柱子(对于饲料及玉米加工副产品等颜色较深的样液,先用10mL 0.1%吐温20-PBS清洗,再用10 mL 10%水冲洗柱子,之后用10mL水冲洗柱子。
),流速1秒/滴,真菌毒素亲和柱报价,弃去流出液,直至2~3mL空气通过柱体,保证柱子内没有残余液体;

----准确加入1.5mL(色谱级)洗脱,真菌毒素亲和柱厂家,流速自然重力,直至2~3mL空气通过柱体,保证柱子内没有残余液体。
收集全部洗脱液,进行相关测定。



亲和柱——亲和层析的应用

抗原和利用抗原、之间高特异的亲和力而进行分离的方法又称为亲和层析。
例如将抗原结合于亲和层析基质上,就可以从中分离其对应的。
在蛋白质工程菌发酵液中所需蛋白质的浓度通常较低,用离子交换、凝胶过滤等方法都难于进行分离,而亲和层析则是一种非常有效的方法。
将所需蛋白质作为抗原,经动物后制备,将与适当基质偶联形成亲和吸附剂,就可以对发酵液中的所需蛋白质进行分离纯化。
抗原、间亲和力一般比较强,其解离常数为108-10?12M,所以洗脱时是比较困难的,真菌毒素亲和柱公司,通常需要较强烈的洗脱条件。
可以采取适当的方法如改变抗原、种类或使用类似物等来降低二者的亲和力,以便于洗脱。

另外金黄色球菌蛋白A(ProteinA)能够与球蛋白G(IgG)结合,可以用于分离各种IgG。



亲和柱——原理介绍

亲和柱的功能基于抗原与间可逆的特异性结合反应,使其可从复杂样品基质中特异性地回收目标化合物。
上样后,真菌毒素亲和柱,柱中以共价键形式偶联在凝胶上的会与抗原(即目标化合物)特异性结合,杂质不会被结合,大部分随样品溶液流出小柱。
通过淋洗的方式除去小柱内剩余杂质后,使用其他洗脱液(根据对应产品说明书选择)进行洗脱即可得到洁净的目标化合物溶液,可直接用于后续检测。



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