ELISA试剂盒的测试要求

做好对照

正式试验时，应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件，河南沙丁胺醇ELISA试剂盒，待检样品应作一式二份，以保证实验结果的准确性。
有时本底较高，沙丁胺醇ELISA试剂盒报价，说明有非特异性反应。

实验条件的选择

在ELISA中，进行各项实验条件的选择是很重要的，其中包括:

（1）固相载体的选择：许多物质可作为固相载体，如聚乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。
其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。
常用的是40孔聚乙烯凹孔板。
不管何种载体，在使用前均可进行筛选：用等量抗原包被，在同一实验条件下进行反应，观察其显色反应是否均一性，据此判明其吸附性能是否良好。

（2）包被（或抗原）的选择：将（或抗原）吸附在固相载体表面时，要求纯度要好，吸附时一般要求PH在9.0～9.6之间。
吸附温度，沙丁胺醇ELISA试剂盒供应商，时间及其蛋白量也有一定影响，一般多采用4℃ 18～24小时。
蛋白质包被的适浓度需进行滴定：即用不同的蛋白质浓度（0.1、1.0和10μg/ml等）进行包被后，在其它试验条件相同时，观察阳性标本的OD值。
选择OD值大而蛋白量少的浓度。
对于多数蛋白质来说通常为1～10μg/ml。

（3）酶标记工作浓度的选择：首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定（见酶标记部份）。
然后再固定其它条件或采取“方阵法”（包被物、待检样品的参考品及酶标记分别为不同的稀释度）在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。

（4）酶的底物及供氢体的选择：对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应，而本身无色。
有些供氢体（如OPD等）有潜在的致癌作用，应注意防护。
有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体，如TMB和ABTS是较为满意的供氢体。
底物作用一段时间后，应加入强酸或强碱以终止反应。
通常底物作用时间，以10-30分钟为宜。
底物使用液必须新鲜配制，尤其是H2O2在临用前加入。

ELISA试剂盒的应用技术

ELISA检测试剂盒应用定性夹心检测技术，用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板条，这些多肽是中国型HEV毒株氨基酸序列中抗原性很强的肽段，分别来自于该毒株的开放阅读框2和开放阅读框3。
将样品或标准品加入孔中并孵育，如果其中存在HEV IgM，这些就会与HEV 的多肽抗原结合，并固定在上面，洗板除去其它非特异性和样品中的其它成份。
然后加入羊抗人IgM-HRP（辣根过氧化物酶）酶结合物，经第二次孵育后，酶结合物就会与孵育结合上的HEV IgM相结合，洗板除去未结合的酶结合物，加入TMB底物溶液，沙丁胺醇ELISA试剂盒多少钱，在第三次孵育时会发生酶-底物反应，只有那些含有HEV IgM和酶结合物所形成的复合物的孔才会发生颜色变化，加入硫酸溶液终止酶和底物间的反应，并在波长: 450nm处测量O.D.值，按照本HEV IgMelisa试剂盒的测试标准， O.D.值大于或等于Cut-Off值的样品被认为是初试阳性。

Elisa试剂盒的安全性

8. 使用干净的塑料容器配置洗涤液。
使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

2. 洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

3. 底物A应挥发，避免长时间打开盖子。
底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。
避免用手接触，有毒。
实验完成后应立即读取OD值。

4. 加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。

5. 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

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