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Acc-3人涎腺腺样囊性癌细胞智立中特生物
品牌1: 智立中特生物
产品型号: zl-056826
产品规格: 1×10⁶cells/T25培养瓶
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发布时间: 2023-03-07 13:32
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详细信息

  智立中特(武汉)生物科技有限公司主要致力于质粒微生物资源的保护、共享和持续利用,围绕我国生命科学研究、生物技术创新和产业发展等重大需求,探索、发现、收集国内外的微生物资源,妥善长期保存管理;在保证生物安全和保护知识产权的前提下,为工农业生产、卫生健康、环境保护、科研教育提供质粒载体物物种资源、基因资源、信息资源和技术服务。旗下质粒载体网是一款提供质粒载体展示及定制的型网站,由智立中特(武汉)生物科技有限公司联合多家企业公司科研院校共同打造!主要展示了各种基因类型下的质粒载体!


  我们的工作主要包括:广泛分离、收集、保藏、交换和供应各类微生物质粒菌种;保存用于专利程序的各种可培养生物材料;质粒载体类保藏技术研究;微生物分离、培养技术研究;微生物鉴定和复核技术研究;保藏菌种的资料情报收集和提供及编辑微生物菌种目录。

  

细胞名称Acc-3(人涎腺腺样囊性癌细胞)


  种属人


  年龄(性别)男


  组织来源唾液腺腺样囊性癌


  生长特性贴壁


  细胞形态上皮细胞样


  背景描述Acc-3细胞源自一位49岁男性的腺样囊性癌;Acc-3细胞能表达角蛋白。


  生长培养基DMEM高糖+10%FBS+1%P/S


  培养条件气相:空气,95%;CO2,5%温度:37℃


  细胞培养步骤


  一.培养基及培养冻存条件准备:


  准备DMEM/F12培养基;优质胎牛血清,10%;400ng/mL氢化可的松,双抗,1%。


  1)注意事项:


  (a)在细胞生长的初始阶段,细胞以贴壁的形式生长并呈现出长方体的形态和有“伪足”延伸。随着培养时间的增加,细胞呈现圆形并以叠加的形式生长。细胞密度达到一定的程度,会有细胞以悬浮的方式散落到到培养基中,镜下观察会发现悬浮和贴壁的细胞会同时出现。


  (b)该细胞传代时不需要用胰酶消化。传代时,用无菌细胞刮刮拭培养表面将细胞刮落,收集离心后重悬接种到新的培养瓶中。


  (c)该细胞形态上包含松散贴壁的纺锤形和圆形或者立方形。当细胞密度较大时,细胞会轻微脱落变圆或者许多细胞堆积在一起,有些细胞甚至脱落漂浮。这些漂浮的细胞是存活的,在传代时应收集起来,离心后细胞沉淀可以继续培养。


  (d)血清质量差异可能引起细胞贴壁能力变化,应选用高质量的胎牛血清。


  2)培养条件:气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37摄氏度


  3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。


  二.细胞处理:


  1)冻存细胞的复苏:


  将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。


  2)细胞传代:如果细胞密度达70%-90%,即可进行传代培养。


  该细胞为悬浮和轻微的贴壁细胞,传代可以参考以下方法:该细胞用细胞刮铲替代胰酶来对细胞进行处理。用无菌细胞刮铲刮拭细胞附着培养表面将细胞刮落,收集细胞后离心去上清,重悬后接种到新的装有新鲜培养液的培养瓶内。收货后次传代1:2进行,后续可以根据实际的情况以1:2~1:4的比例进行传代。


  3)细胞冻存:收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。

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